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 來源:實驗動物那些事兒 日期(qī):2024.05.14 

小鼠麻醉指導原則

目的

本文是由ARC獸(shòu)醫人員設計的小鼠麻醉指導原則,旨在提供一般建議。這並不(bú)意味著它包含了適用於小(xiǎo)鼠的所(suǒ)有可能藥物組合的詳盡列表。具體的麻醉(zuì)方案(àn)應根據特定情況和研究需求與所在機構的獸醫合作(zuò)製定。

麻醉是使動物(wù)完全或部分失去感覺,伴隨或不伴隨意識喪失。動物可能需要麻醉進行手術、可能引起疼痛的非手術操作,或(huò)需要固定的非疼痛操作。在麻醉前、麻醉過程中和麻醉後,必須采取措施確保動物的安全和麻醉的有效(xiào)性。

麻醉可通過胃腸外給(gěi)藥或吸入給藥的方式(shì)進行(háng)。藥物的(de)選擇取決於具體操作、研(yán)究目的和其他因(yīn)素(sù),如動物的年齡。對於新生小鼠,有些特別考慮下文進行了概述。如對藥物選擇有疑問,請谘詢所在機構的獸醫。

01、麻醉的一(yī)般指導原則和注意事項

適應期:建議所有動物在運輸後適應一(yī)周,以防止應激引起(qǐ)的反應。動物至少需要72小時才能恢複到基本生理狀態。

禁食:由於小鼠(shǔ)無法嘔(ǒu)吐,通常麻醉前無需禁食。然而,如需禁食(例如為了保持(chí)體重),因小(xiǎo)鼠的高(gāo)代謝率,禁食時間(jiān)不應超過2-3小時。請注(zhù)意,切勿限製(zhì)飲(yǐn)水。

眼睛保護:在麻醉狀(zhuàng)態(tài)下,小鼠的(de)眼睛會持續睜開,可能導致角膜幹燥和損傷。因此,在如下條件(jiàn)下(xià),應塗抹眼膏(如Puralube® 或 Lacrilube®)來保護眼睛。

麻醉持續時間超過 5 min;

通過麵罩進行麻醉。

監護:無論使用何種麻醉劑,均應監測麻醉狀態下的小鼠,以確保心髒和呼吸功能不(bú)被過度抑製,以及麻醉深度適當。

在沒有專用設備的情況下,可以監測(cè)以(yǐ)下麻醉小鼠(shǔ)的參數:

麻醉深度:通過掐指檢查;

呼吸(xī)頻率(lǜ)和模式:正常未受幹擾的呼吸率約為(wéi) 180 bpm,麻醉期間可接受 50% 的緩慢下降速(sù)率;

粘膜顏色:應為粉紅色而非藍色或灰色;

體溫:可使用直腸溫度計監測體溫,體溫應(yīng)保(bǎo)持在 36℃ 以上;

血氧飽和(hé)度(dù)和心率:可用專用的(de)齧齒類(lèi)動物脈(mò)搏式血(xuè)氧儀監測血氧飽和度 (> 95%) 和心率(300-800 bpm);

如對監護或監護設備有任(rèn)何問題,請與所在機構的獸醫聯係。

保溫:所有種屬在麻醉狀態下均存在低體溫的風險。小鼠由於體表麵積與體重比高,尤其容易受(shòu)到影響。低體溫對動物會產生顯著(zhe)的(de)生理應激,可能延長恢複時間(jiān)並有潛在致命風險。

在所有麻醉過程中提供額外的保溫措施。

補充熱源(yuán)包括循環水毯、電熱墊和可在微波或水浴(yù)中加熱的(de)市售產品(如等溫墊或凝(níng)膠加熱器)。

切勿直接將(jiāng)動物(wù)放在熱源上。

如對使用或購買額外的保溫來源有疑問,請與(yǔ)您所在機構的獸醫聯係。

補液:在麻(má)醉(zuì)時間較長或動物患病、老年或虛弱的情況下,考慮腹腔或皮下注射溫(wēn)熱的液體。更多信息請谘詢(xún)您的獸醫。

恢(huī)複:持續監(jiān)測(cè)動物直至(zhì)其完全恢複。

在幹淨的籠子裏(lǐ),將動物(wù)放在紙巾上(不使用墊料)。這樣可以最大程度地減(jiǎn)少氣管阻塞或肺炎的風險。

麻(má)醉(zuì)後的動物(wù)單獨放在一個籠子裏(lǐ)進行恢複。

恢複期間繼(jì)續提供額外(wài)的保溫。

當動(dòng)物能夠走動時,將其送回原籠中子,並提供飼料和水(shuǐ)。

根據(jù)所進行的(de)手(shǒu)術,為了避免同籠夥伴啃縫線或(huò)切口處的創傷,小鼠可能需(xū)要在術後(hòu)階段單獨飼養。任何單獨飼養的計劃都應包括在IACUC方案中,以便進行審查和批準。

02、麻醉藥物和程序

吸入麻醉劑: 異氟烷是首選的吸入麻醉劑。 起(qǐ)效快、恢複可靠。

A. 吸入麻醉(zuì)可以通過滴瓶法、誘導室、麵罩或氣管插管使用(yòng)精密蒸汽器進(jìn)行。

i.滴瓶法:

a.請勿使小鼠直接接觸液體吸入(rù)麻醉劑(可通過在棉(mián)花或紗布上放置不可滲透的網格來實現)。

b. 由於無法(fǎ)控製室內的麻醉劑濃度,並且濃度(dù)可能迅速達到有毒水平,因此該方法僅適用於非常短的手術,如尾部活檢、皮下腫瘤植(zhí)入或麵罩麻醉前的誘導(dǎo)。

ii.誘導(dǎo)室、麵罩和氣管插管:

a.這些需要(yào)配備氧氣源和精密蒸發器的氣體麻(má)醉機。一(yī)些研究單位可能使用室內空氣而不是純氧作為(wéi)氣源(yuán),這也是可(kě)接受的。

b.蒸發器必須與特定的吸入(rù)麻醉劑兼容。

c.由於小鼠呼吸能(néng)力較小,使(shǐ)用非循環呼吸(xī)係(xì)統。

iii. 當使用(yòng)吸入性麻醉時,使用通風櫃或配備氣(qì)體清除係統的麻(má)醉(zuì)係(xì)統,以盡量(liàng)減少職業暴露於排出氣體。

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B. 注射麻醉(zuì)劑:氯(lǜ)胺酮/賽拉嗪聯合使用是小鼠的首(shǒu)選(xuǎn)注射麻醉劑。

下麵列出了其他常用的注射(shè)劑。

i. 小鼠對各(gè)種麻醉藥的敏感性差(chà)異顯著。 年齡、體質(zhì)、品係、健康狀況(kuàng)、基(jī)因調控和性(xìng)別等(děng)因素都可能影響麻醉敏感性。以下劑量僅為一般指導原則,基於上述因素可能存在顯著差異。在您的方案中添加麻醉劑時,建議提供一(yī)個範圍,以允許根據每隻動物的特定需求進行給藥。

ii. 不建議在小鼠(shǔ)中進行肌肉(ròu)注射(IM),因為可能導致組織刺激、跛行和自殘等(děng)並發症。

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*一個很好的初始方案是 100 mg/kg 氯胺(àn)酮和 7 mg/kg 塞拉嗪。

**阿替美唑(5 mg/mL)是右美托咪定(0.5 mg/mL)濃度的 10 倍。

您需要 4-6 倍於右美托咪定體積的阿替美唑(5 mg/mL)來逆轉右美(měi)托咪定。然而,阿替美唑的安全範圍非常高,因此如果逆轉非常緊急,給予右美托咪定等體(tǐ)積的阿替美唑,可使阿替美唑的劑量增加 10 倍,這是安全的。

同樣,使用與塞拉嗪(20 mg/mL)等體積的阿替美唑 (5 mg/mL) 逆轉也有(yǒu)效。雖然塞拉嗪(qín)具有更高的濃度(20 mg/mL),但阿替美唑(5 mg/mL)更(gèng)純淨,且與(yǔ)α2 受體結(jié)合更緊密,因此等體積逆轉塞拉嗪(qín)也可行。

C. 注射麻醉劑的一種類型是局部麻醉劑。

i. 局麻藥通過特異性(xìng)結合神經細胞膜上的電壓門控 Na + 通道來阻斷神經衝動。

ii. 給藥途徑(jìng)包括粘膜(鼻、眼(yǎn)等)局部(bù)給藥或直接注射到組織和(hé)神經束(shù)周圍。

iii. 在疼痛刺激(如切口)之前給予局部麻醉劑被(bèi)認為(wéi)是輔助鎮痛藥物,與阿片類和 非甾體抗炎藥(NSAID)一起(qǐ)使用。

iv. 由於持續時間較短(數小時),不鼓勵將局部麻醉劑作(zuò)為(wéi)主要鎮痛藥(yào)物使用,

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03、對小鼠麻醉的特殊考慮:仔鼠麻醉

目前文獻中描述了幾種適用於新生齧齒(chǐ)動物的麻醉方法,包括注射麻醉、吸入麻醉和低溫(wēn)麻醉。 

新生齧齒動物的麻醉會導致(zhì)親代啃食(shí)後代的問(wèn)題。可通過(guò)確保新生仔鼠完(wán)全恢複後再(zài)歸還給(gěi)母鼠來減少這種情況。其(qí)他措施(shī)包括讓幼(yòu)仔接觸來自於母(mǔ)鼠籠中的汙染墊料,並將幼仔放在窩仔中間位置。

低溫麻醉

低溫麻醉隻適用於(yú)7日(rì)齡(líng)以下的新生齧齒動物,並(bìng)且不應用於持續時間超過30分鍾的手術。

動物不應直接置於冰上(在動物和底(dǐ)層冰(bīng)浴之間(jiān)使用乳膠手套或(huò)其他物質)。

當足部反射消失時,動物(wù)已達到適當的(de)麻醉水(shuǐ)平(píng)。

手術過程中請勿使用白熾燈,因為它會使手術區域變熱,導致(zhì)動物從手術麻醉狀態中蘇醒。

麻醉後(hòu),動(dòng)物應緩慢複溫。快速升溫可能會導(dǎo)致組織損傷。可使用循環水毯、加熱墊 (40℃) 或培養箱 (33℃) 中給動物重新升溫。

幼仔能夠在無(wú)直接物理刺激的情(qíng)況下移動後,可將其歸還給母鼠。

吸入麻醉

新(xīn)生齧齒動物可能(néng)比成年齧齒動物需要更(gèng)長的吸入麻醉誘導時間。

在(zài)麻(má)醉(zuì)盒中進行誘導(dǎo)通常需 5% 異氟(fú)烷,維持(麻醉誘導(dǎo)盒(hé)或鼻(bí)錐)需 1-2%(流速 = 0.3-0.6 L/min)。

注射麻醉

氯(lǜ)胺酮(tóng)/塞拉嗪是 7 日齡以上小鼠的推薦注射麻醉劑:通過 27g 針頭 IP 注射 50-150 mg/kg 氯胺(àn)酮和 5-10 mg/kg 塞拉嗪(最大體積 = 0.5 mL)。

對於(yú)7日齡以上的小鼠,推薦使用氯胺酮/塞拉嗪作為注射麻醉(zuì)劑:使用27g針頭腹腔注射50-150 mg/kg氯胺酮和5-10 mg/kg塞拉嗪(最大體積=0.5 ml)。

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